血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化試劑盒
Vascular Smooth Muscle Cell Calcification Kit
貨號:YJ-YD-005
價格: 1280.0
規(guī)格: 200ml
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
Vascular Smooth Muscle Cell Calcification Kit 血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化試劑盒 | YJ-YD-005 | 200ml | 避光 |
產(chǎn)品描述
由團隊精心優(yōu)化的血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化試劑盒,包括適合血管平滑肌細胞鈣化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、鈣化因子和雙抗。
本產(chǎn)品可增強VSMCs細胞的鈣化能力。 本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。
試劑盒組成部分
規(guī)格 | 200mL/Kit | |
體積 | 數(shù)量 | |
Vascular Smooth Muscle Cell Calcification Basal Medium 血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 173mL | 1 |
Supplement Mix 鈣化因子 | 25mL | 1 |
Penicillin-Streptomycin 雙抗 | 2mL | 1 |
使用方法
血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化完全培養(yǎng)基的配制
1. 使用前,請將鈣化因子置于2-8℃環(huán)境中過夜解凍直至鈣化因子完全溶解,解凍后輕晃試劑瓶以確保鈣化因子混合均勻,隨后即可使用。
注意:解凍后的鈣化因子中可能會含有少量絮狀沉淀,這些物質(zhì)對產(chǎn)品質(zhì)量無影響。不建議采取 過濾的方法去除沉淀物,此操作會導(dǎo)致鈣化因子中部分營養(yǎng)物質(zhì)流失。
2. 用75%乙醇擦拭試劑盒中各瓶/管的開口外壁,室溫放置數(shù)秒使酒精揮發(fā)。
3. 在超凈臺中無菌地打開以上各瓶/管。
4. 將25 mL鈣化因子和2 mL雙抗全部加入173 mL血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,即可配 成200 mL血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化完全培養(yǎng)基。
注意:
① 無菌吸取少量基礎(chǔ)培養(yǎng)基洗滌各瓶/管,盡可能的將所有組分完整的加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
② 輕晃配制好的完全培養(yǎng)基,確?;旌暇鶆蛑蠹纯墒褂谩?/span>
③ YJ完全培養(yǎng)基試劑盒中的每個成分均為無菌分裝,但為確保完全無菌, 也可以將混合后的完 全培養(yǎng)基進行再次過濾除菌(0.22 μm 濾膜)。
培養(yǎng)器皿表面的包被
為了避免誘導(dǎo)過程中血管平滑肌細胞出現(xiàn)漂浮現(xiàn)象,建議對鈣化誘導(dǎo)使用的培養(yǎng)器皿表面用促貼壁試劑包被。
所需材料
促貼壁試劑(AS01-001D)
操作
1. 加適量促貼壁試劑到培養(yǎng)器皿中,能覆蓋整個培養(yǎng)器皿底面的量即可。
2. 搖勻液體使其覆蓋整個培養(yǎng)器皿的底面。
3. 將鋪有促貼壁試劑的培養(yǎng)器皿放置在超凈臺至少30min。
4. 30 min后棄去促貼壁試劑,待培養(yǎng)器皿晾干后,即可用于接種細胞。
注意: 包被促貼壁試劑的培養(yǎng)器皿在無菌和不蒸干的條件下,可以在4℃保存兩周。
血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化操作規(guī)程
所需材料
n 0.25% 胰蛋白酶-EDTA
n Phosphate-Buffered Saline (1×PBS) (貨號:YJ-0800)
n 血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基(貨號:PriMed-YJ-004)
n 血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化試劑盒(貨號:YJ-YD-004) 操作
注意:本操作規(guī)程以六孔板為例
1. 將血管平滑肌細胞置于37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2. 當細胞融合度達到80-90%時,用0.25% 胰蛋白酶-EDTA進行消化。
3. 將消化下來的血管平滑肌細胞按照2×104 cells/cm2 的細胞密度接種在事先包被促貼壁試劑的六孔 板中,每孔加入2 mL完全培養(yǎng)基。。
4. 將細胞置于37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 當細胞融合度達到70%左右時,小心的將孔內(nèi)完全培養(yǎng)基吸走,向六孔板中加入2 mL血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化完全培養(yǎng)基。
6. 每隔2-3天換用新鮮的血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化完全培養(yǎng)基(使用前需預(yù)熱至37℃)
7. 誘導(dǎo)15-20天后,視細胞的形態(tài)變化及生長情況,用鈣化鑒定試劑盒進行染色。
注意:為防止誘導(dǎo)后的細胞脫落,建議鈣化過程中出現(xiàn)大量鈣結(jié)節(jié)之后,換液形式變?yōu)槊績商煲淮伟肓繐Q液。
產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件
1.所有產(chǎn)品均需避光保存。
2.保存條件及有效期
試劑名稱 | 保存條件 | 有效期 |
血管平滑肌細胞誘導(dǎo)鈣化基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 2-8℃ | 1年 |
鈣化因子 | -20℃ | 2年 |
配制好的完全培養(yǎng)基 | 2-8℃ | 1個月 |
3.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過保質(zhì)期,必須放棄使用。
4.為確保產(chǎn)品效果,請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。
質(zhì)量控制
血管平滑肌細胞鈣化誘導(dǎo)培養(yǎng)基已用各種屬血管平滑肌細胞進行了性能測試。
主要的鑒定標準包括:
• 無菌檢測(細菌、真菌和支原體檢測)
• pH測試
• 滲透壓檢測
• 內(nèi)毒素檢測
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