普魯士藍染色實驗服務(wù)
普魯士藍染色簡介:
Perls普魯:士藍反應(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍色,常見于吞噬細胞內(nèi)或間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價鐵鹽。其染色原理為:三價鐵離子被從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,生成不溶解的藍色化合物,即普魯士藍。
普魯士藍染色實驗意義:
Perls普魯:士藍是非常經(jīng)典的組織化學反應,是顯示組織內(nèi)三價鐵的一-種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法。
實驗步驟:
(1)石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯| 20min-二甲苯11 20min-無水乙醇I 5min-無水乙醇1I 5min-75%酒精5min,自
來水洗,蒸餾水洗3遍。
(2)普魯士藍染色:將亞鐵青化鉀溶液和鹽酸溶液等比例混合成普魯士藍染液,切片入染液中染色1h,蒸餾水洗2遍。
(3)核固紅染色:核固紅染液染色1-5min,流水沖洗。
(4) 切片依次放入無水乙醇I 5min-無水乙醇11 5min-無水乙醇11 5min-二甲苯| 5min-二甲苯15min透明, 中性樹膠封片。
(5)顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
實驗結(jié)果:
鐵離子呈藍色:細胞核呈紅色。
實驗技巧:
(1)普魯士藍染液要現(xiàn)配現(xiàn)用。
(2)切片染色前用蒸餾水洗干凈,防止自來水中的鐵離子在染色中反應,造成假陽性。
實驗代做服務(wù):
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細胞檢測 | 細胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
|
免疫共沉淀 | 真核表達載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標定量(Label-free)實驗 |